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《基因工程》习题集  

2009-09-28 17:00:28|  分类: 默认分类 |  标签: |举报 |字号 订阅

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第一章    基因工程概述

1.通过本章的学习,请举两个基因工程应用的具体例子并加以简单说明。

 

第二章     基因工程的载体和工具酶

1. 在基因工程研究和应用中,为什么必须使用载体来克隆外源DNA片段?

2. 分析影响限制性内切核酸酶酶切的因素有哪些?

3. 举例说明大肠杆菌DNA聚合酶Ι在基因工程中的应用。

4. 请描述用载体pUC18来克隆DNA片段的过程。在这个克隆实验中,你怎样选择含有克隆片段的重组子?

 

第三章     基因工程的常规技术

1. PCR扩增一个500bp大小的DNA片段,若用凝胶电泳检测,用多大浓度的琼脂糖凝胶?

2. 试述DNA切口平移标记探针的原理。

3. 试述PCR技术的基本原理,如果想通过PCR技术扩增,然后在大肠杆菌中克隆一个约500bpDNA片段,请描述其克隆过程。

4. 比较两种DNA测序的基本原理。

 

 

第四章     基因在大肠杆菌、酵母的高效表达                                             

1.查阅载体pET42a的结构图,以载体pET42a、宿主菌BL21DE3)为例,简述作为一个良好的表达载体需要具备哪些条件?影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些?

2.目的基因在大肠杆菌种表达时,为什么常用融合蛋白的表达方式?哪些蛋白或多肽可以用作担体序列?各有什么特点?

3.简述包含体形成的原因和蛋白质折叠复性的主要方法。

4.简述几种常用甲醇酵母载体的特点和其转入甲醇酵母后的筛选、鉴定方法。

5.列表比较大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞表达系统得优、缺点。

6.自选一种新型的有药用价值的细胞因子,提出基因克隆、蛋白质表达与纯化、生物活性测定的实验研究方案。

 

第五章     转基因植物     

1.什么是Ti质粒载体,其介导的植物转基因原理如何?

2.什么是基因沉默,导致转基因发生失活的原因有哪些?

3.转基因植物作为生物反应器的优势在哪里?

4.谈谈你对转基因植物的安全性的认识。

 

第六章            转基因动物 

1.什么是ES细胞?它在转基因动物中的应用如何?

2.请举几个动物转基因的方法。

3.比较在细菌、真核细胞和动物个体中表达外源基因的优缺点。

4.谈谈你对转基因动物的安全性问题的认识。

                     

第七章     基因治疗

1.基因治疗的病毒载体应该具备哪些基本条件?简述几种常见的病毒载体系统并比较其优缺点。

2.查阅文献,简述单基因遗传病——进行性肌营养不良和多基因遗传病——先天性心脏病的发病机制和基因治疗策略。

3.针对肿瘤的基因治疗有哪几种主要途径?试对每种途径各举一例进行说明。

4 利用RNA水平上的一些技术对HIV进行基因治疗有哪些方法?对丙型肝炎病毒(HCV)和SARS冠状病毒的基因治疗方法有哪些呢?

5.评述基因治疗的发展前景。

 

第八章      蛋白质工程

1. 列表比较几种定点突变方法的优缺点。

2.碱性磷酸酶在ELISA诊断等领域有广泛的应用。为提高碱性磷酸酶的活性,请设计其定向进化的实验方案。

3.查阅文献,评述绿色荧光蛋白(GFP)的蛋白质工程研究进展和发展趋势。

4TNF10,又称TRAIL,是新型、高效、特异性抗肿瘤细胞因子,在美国已经进入临床试验。试提出具有自主知识产权的TNF10蛋白质工程研究开发的技术路线。

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