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各种蛋黄中卵磷脂含量的比较  

2009-09-03 21:54:21|  分类: 默认分类 |  标签: |举报 |字号 订阅

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各种蛋黄中卵磷脂含量的比较

张钦增 

(三明学院06级生物技术  福建三明  365004

摘要  磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。蛋黄中含有卵磷脂和脑磷脂,卵磷脂易溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质将卵磷脂和脑磷脂分离,提取卵磷脂1

通过对卵磷脂中磷含量的测定,比较不同蛋中卵磷脂含量,并进行归纳、分析。

关键字   卵磷脂提取   含量测定  比较

 

1  前言

1.1  卵磷脂简介


 卵磷脂是一种含磷的脂肪,是生物体的重要组分之一。卵磷脂的英文名称lecithin来源于希腊文lekithos,意为黄,化学式为

由非极性部分(apolar)和极性部分(polar)组成。非极性部分是疏水性的,由Oelsaeure(油酸)和Palmitinsaeure(棕榈酸)组成。极性部分是亲水性的,由一个磷酸分子和胆碱组成。

 卵磷脂在蛋黄、大豆、鱼头、芝麻、蘑菇、山药和黑木耳、谷类、小鱼、动物肝脏、鳗鱼、赤腹蛇、眼镜蛇、红花籽油、玉米油、向日葵等食物中都有一定的含量,但营养及含量较完整的还是大豆、蛋黄和动物肝脏。

蛋黄卵磷脂((lecithin)的主要成分为磷脂酞胆碱(PC),其他成分还有:脑磷脂(PE),溶血磷脂酞胆碱((LPC)和神经鞘磷脂(SPM),而蛋黄磷脂有别于大豆磷脂的主要特点在于含卵磷脂量高,可达到70%-80%.卵磷脂属于类脂类生理活性物质,又是一种天然表面活性剂n1.卵磷脂也可在不同酶的作用下,有选择性的水解酷键,得到不同的产物。目前,国际上生产卵磷脂的方法如有机溶剂萃取法,柱层析法,乙酸化法,高效液相色谱法,半透膜法,复合盐沉淀法,超临界二氧化碳萃取法等2-4

卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”5

 

 

1.2  研究现状

 

1.2.1  化学成分的研究

卵磷脂是由甘油、脂肪酸、磷酸、胆碱结合而成的有机物。胆碱的结构式为(CH3)3N (OH) CH2CH2OH。所以卵磷脂中不但含磷,而且还含氮,而普遍的脂肪中不含PN。新制出的卵磷脂是白色蜡状物质,在空气中易变为黄色或棕色,密度为1.0305/厘米324℃),不溶于水,溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷(CHCl3)等中。

1.2.2  生物化学研究6

将卵磷脂涂敷的硅胶作为生物膜固定相,并以此研究了药物与生物膜的相互作用.实验发现,卵磷脂涂敷的硅胶固定相的适宜使用温度为20℃~30,而且卵磷脂中合适的胆固醇含量会使制备的生物膜固定相的稳定性有所增加.对药物在 种生物膜色谱固定相上的保留行为的研究表明,胆固醇含量、缓冲试剂组成、流动相中盐浓度及pH值等都会影响色谱柱对药物的选择性.卵磷脂涂敷生物膜色谱固定相的制备方法简便,通过固定相及流动相的改变可以很方便地模拟人体的生理环境,因而可以用于研究药物在体内的吸收和分布状况以及药物的初步筛选.

1.2.3  医疗研究

卵磷脂是一种很好的保健食品,近年来,卵磷脂在临床医疗上得到了广泛的应用,它的主要药理作用有:  

一、肝脏的保护神  磷脂中的胆碱不但可预防脂肪肝,还能促进肝细胞再生,同时,磷脂可降低血清胆固醇含量,防止肝硬化并有助于肝功能的恢复7

二、糖尿病患者的营养品  卵磷脂不足会使胰脏机能下降,无法分泌充分的胰岛素,不能有效地将血液中的葡萄糖运送到细胞中,这是导致糖尿病的基本原因之一。

三、胎、婴儿神经发育的必需品  卵磷脂可以促进大脑神经系统与脑容积的增长、发育。      

四、可消除青春痘、雀斑并滋润皮肤  卵磷脂能分解体内过多的毒素,并排出体外。

五、可预防老年痴呆的发生  乙酰胆碱是神经系统信息传递时必需的化合物,人脑能直接从血液中摄取磷脂及胆碱,并很快转化为乙酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力衰退的进程,预防或推迟老年痴呆的发生。      

六、良好的心理调和剂  经常补充卵磷脂,可使大脑神经及时得到营养补充,保持健康的工作状态,利于消除疲劳,激化脑细胞,改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等症。

卵磷脂是一种全天的能量来源,每日服用,能增进健康活力。 它不但对病后复原者及节食减肥人士特别有效,对于极可能由于精液中缺乏卵磷脂而导致性疲倦及活力不振的男士已非常有效。8

总之,卵磷脂不仅具有很高的营养价值,还具有生理调节功能,能促进人体新陈代谢,增强免疫力,预防疾病,增进健康;确实是人类重要的保健品。正如美国唐诺.布朗博士所说:“没有那一种营养素象磷脂一样能在那么多方面作用来增进、保持人们的健康和青春活力。” 9

2材料与方法

 

2.1材料

 

2.1.1试验材料

鸡蛋一个、鸭蛋一个、鹌鹑蛋两个,都是购买于大三元超市

2.1.2试剂

95%乙醇 

10%氢氧化钠溶液 

无水磷酸氢二钠   

消化剂(硝酸:高氯酸=41 

显色剂10

Ⅰ、17%硫酸:17ml浓硫酸(比重1.84)缓慢加入83ml水中。

Ⅱ、2.5%钼酸铵溶液:2.5g钼酸铵溶于100ml水。

Ⅲ、10%抗坏血酸溶液:10g抗坏血酸溶于100ml水。贮棕色瓶中。溶液呈淡黄色尚可用,呈深黄色甚至棕色即失效。

临用时将上述三种溶液与水按如下比例混合,V17%硫酸):V2.5%钼酸铵溶液):V10%抗坏血酸溶液):V(水)=1112

 

2.1.3  仪器

电热恒温水浴锅(型号HSG-4  722S可见分光光度计    电子天平

移液抢100ul-500ul1ml-5ml各一支

 

2.2  方法11-15

(一)卵磷脂的提取

称取三种蛋的蛋黄约10g于三个烧杯中,加入温热的95%乙醇30ml,边加边搅拌均匀,冷却后过滤,直至滤液完全透明。将滤液置于蒸发皿内,水浴锅中(60℃)蒸干,所得干物即为卵磷脂。

(二)磷标准曲线制备

对照品溶液的制备:取以115干燥至恒重的无水磷酸氢二钠对照品适量,精密称取(1.775g),加水溶解,定量稀释制成每1ml0.04mg磷的溶液即得。(用于做标准曲线)

准确吸取磷标准使用液(第步中的试剂)0   0.1   0.15    0.2    0.25    0.30ml) ,然后全部加水至0.3ml,加0.4ml消化剂,依次加4ml显色剂摇匀,70度水浴10分钟后,在分光光度计700nm处测吸光值,以测定的吸光度对磷酸含量绘制标准曲线。

(三)供试品的制备

精密称量三种蛋的卵磷脂0.03g(加少量无水乙醇溶解)于三个小烧杯中,加25ml氯仿甲醇(51)萃取五分钟。

(四)样品测定

取九支试管,分三组加入三种样品测定溶液0.30ml(准确量取),然后分别加消化剂0.4ml,电炉上消化至无色(消化时间大约在40分钟左右,溶液会先变清再变浑浊最后变清),冷却后都加显色剂4ml,摇匀,70度水浴10分钟,在分光光度计700nm处测定OD值,以测出的OD值在标准曲线上查得未知液中的磷含量。

 

3  结果

 

标准磷在A700nm测定值:

试管号

0

1

2

3

4

5

磷含量/ml

0.00

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

A700nm

0.000

0.035

0.048

0.063

0.089

0.103

样品在A700nm测定值:

样品

鸡蛋

鹌鹑蛋

鸭蛋

试管号

1

2

3

平均值

1

2

3

平均值

1

2

3

品均值

A700nm

0.019

0.013

0.015

0.016

0.026

0.028

0.028

0.027

0.195

0.123

0.014

0.014


所以鸡蛋卵磷脂中磷的含量为0.05ml,鹌鹑蛋卵磷脂中的磷含量为0.08ml,鸭蛋的为0.04ml

4  小结与讨论

 

通过以上三种蛋的初步测定可得到,在相同的条件下,鹌鹑蛋卵磷脂中磷的含量较其它两种高,从而说明鹌鹑蛋蛋黄的卵磷脂浓度较高,鸡蛋蛋黄卵磷脂浓度次之,鸭蛋最小。

从卵磷脂浓度含量来看,2个鸭蛋=1.6个鸡蛋=1个鹌鹑蛋,但相同重量的鸡蛋和鹌鹑蛋所含营养素其实基本相同,差异不大16。从性价比来看,鸡蛋最好,所以日常生活中不妨以鸡蛋为主,这样更经济、食用更简便些17

本实验是结合课本以及其他书籍、网络归纳出来的,在操作过程中也出现了许多问题,主要有以下几方面:

1)在蛋黄提取时,经验不足。应在鸡蛋上打一个小洞,把蛋清倒出来留下蛋黄。

2)对于消化剂还有待于研究,硝酸与高氯酸混合液遇到较高的温度就会飞溅出来,试验过程温度不要太高,防止意外事故的发生。

3)本实验的显色剂直接用定磷试剂,可能存在一定的差别,有待于改进。

4)本实验所测得的是粗卵磷脂,其纯度还不够,应用乙醇提取再用丙酮沉淀和直接用丙酮处理再用乙醇抽提18

(5) 卵磷脂还含大量的甘油、脂肪酸、胆碱等有机物,要比较各种蛋卵磷脂浓度的差别,还进行多方面、多角度是测量,提高试验准确性。

 

5        展望

 

20年来,我国蛋黄卵磷脂的研究和应用取得了较大进展,但是对各种蛋中的成分还未充分研究、比较,未能提取高纯度的食用、医药用卵磷脂.我国禽蛋丰富,价格低廉,而且活性卵磷脂对人体保健功能正逐渐引起人们的关注,市场的需求量不断扩大.因此,研究、比较各种蛋黄中的成分含量,进一步开发提取高纯度卵磷脂产品意义重大.这不仅可解决我国蛋黄粉的积压问题,同时也可得到高纯度的卵磷脂产品.随着高新技术的发展与应用,相信不久的将来,各种蛋营养成分的比较,优质蛋黄卵磷脂产品等将得到充分开发与广泛应用.

 

致谢

本论文是在邱瑾老师的悉心指导下和曾淑兰同学一起完成的。无论是论文的选题、实验方案的确定、实验结果的分析以及论文的撰写,都得到了老师的热心帮助,在此表示忠心的感谢!此外,对方丽华老师、杨朝辉老师为本实验所提供的实验仪器、药品等,表达深深的谢意!对操作过程中提供无私帮助的同学一并表示感谢!

参考文献

 

【1】       陈钧辉等, 核酸的定量测定(定磷法), 生物化学实验第三版  2007.1

2-4】高兆建,甄宗圆,.蛋黄卵磷脂的分离提纯及鉴定研究[[J].肉类工业,2003,(4):15-18.
     
张秀青,于才渊.高纯卵磷脂的分离提纯方法[[J].粮油加工,2006,(4):45-49.
     Nlelsen H. Insitusolildphase, extraction of phospholipids from heat-coagulated egg yolk by organic solvents[J]. Lebensmittel-Wissenschaftund-Technologies, 2001, 34: 526-532.

吴晓英,林影,.蛋黄卵磷脂的制备研究[[J].食品科学,2004,25

5】百度百科  http://baike.baidu.com/view/200925.htm

6】邬纯鑫,王丽等,林蛙卵卵磷脂对大鼠四氯化碳所致的肝损伤的响影   中华现代临床医学杂志2006.4

7】马明辉;苗玉梅,卵磷脂片对高脂血症降脂作用的临床观察《中国厂矿医学》1999.06. 

8http://www.ppdsi.com/product/cpyl/64726.shtml卵磷脂的作用  中药网  2007.7

9】百度网页 http://bjtime.cn/info/view.asp?id=86

10】陈钧辉核酸的定量测定(定磷法) 生物化学实验第三版  2007.1

11-15】百度百科http://www.foodqs.com/news/jszl03/200672494437.htm
李卫,邵友元,.世界卵磷脂(PC)纯化工艺研究概况[[J].贵州化工,2001,
李卫,.柱层析法分离卵磷脂和脑磷脂[[J].湖北工学院学报,2001,16(2):

16】叶琳 ,第四军医大学唐都医院临床营养学教研室?营养科蛋的性价比2007.10

17郭志平专栏 , 哪种蛋营养好, 父母论坛 2006.11.21

18陆新华  蛋黄卵磷脂的提取及测定  《浙江化工》 2006.03

 

Lecithin in egg yolks in a variety of comparison


ZHANG Qin-Zeng
06 Sanming Institute of Technology of Sanming University

Sanming Fujian  365004
Abstract:
phospholipid cell organisms is an important component, mainly found in soybeans and other plant tissue and animal liver, brain, spleen, heart and other organizations, particularly in more content in the yolk (10 percent). Yolk contains PC and PE, lecithin soluble in ethanol and insoluble brain phospholipids,take advantage of this

nature will be PC and PE separation from lecithin. [1] Through the phosphorus content of the lecithin in the determination of different eggs in the lecithin content, and summed up, analysis.
Keyword:
Lecithin extract    Determination     Comparison

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